د اګاروز جیل الیکټروفوریسس بنسټیز تخنیکونه (1)

1. طبقه بندي

جیل الیکٹروفورسیس په عمودی ډولونو ویشل شوی دی (د کالم جیل او سلیب جیلونو په شمول) او افقی ډولونه (په عمده توګه د سلیب جیل) (شکل 6-18). عموما، عمودی جلا کول له افقی څخه یو څه غوره دی، مګر د افقی جیل چمتو کول لږترلږه څلور ګټې لري: د ټول جیل لاندې ملاتړ شتون لري، د ټیټ غلظت اګروز کارولو ته اجازه ورکوي؛ دا ممکنه ده چې د مختلف ځانګړتیاو د اګرز جیل پلیټونه چمتو کړئ؛ د جیل چمتو کول او د نمونې بار کول خورا اسانه دي؛ د الیکٹروفورسیس چیمبر د جوړولو لپاره اسانه او ارزانه دی. څرنګه چې افقی الیکٹروفورسیس د اګرز جیل پلیټ سره ترسره کیږي چې په بشپړ ډول د الیکٹروفورسس بفر د سطحې څخه شاوخوا 1mm لاندې ډوب شوي، دا د ډوب شوي الیکٹروفورسس په نوم هم یادیږي.

图片2

د الیکټروفوریسس ټانک DYCP-31DN د اګرز جیل الیکٹروفورسس لپاره

2. د بفر سیسټم

د نیوکلیک اسید جلا کولو کې، ډیری سیسټمونه دوامداره سیسټمونه غوره کوي. په عام ډول کارول شوي الیکٹروفورسیس بفرونو کې شامل دي TBE (0.08mol/L Tris·HCl, pH 8.5, 0.08mol/L بوریک اسید، 0.0024mol/L EDTA) بفر او THE (0.04mol/L Tris·HCl, pH 7.8, 0.02mol/L سوډیم اسټیټ، 0.0018mol/L EDTA) بفر. دا بفرونه عموما د 10x سټاک محلولونو په توګه چمتو شوي او د استعمال په وخت کې د اړتیا وړ غلظت سره مینځل کیږي. په اګرز جیل کې د خطي او سرکلر DNA د مهاجرت نرخ د کارول شوي بفر سره توپیر لري. په بفر کې، د خطي DNA د مهاجرت کچه ​​د سرکلر DNA څخه ډیره ده، پداسې حال کې چې په TBE بفر کې، برعکس ریښتیا ده.

3

3. د Agarose جیل چمتو کول

(1) د افقی Agarose جیل چمتو کول

(a) د 1x الیکٹروفورسس بفر په کارولو سره د اګرز جیل اړین غلظت چمتو کړئ.

(b) اګرز ګرم کړئ ترڅو بشپړ تحلیل شي یا په جوش شوي اوبو حمام کې، په مقناطیسي محرک کې، یا په مایکروویو کې. د اګاروز محلول تر 55 درجو پورې یخ کړئ او د 0.5 μg/ml په وروستي غلظت کې د ایتیدیم برومایډ (EB) رنګ اضافه کړئ.

(c) د شیشې یا اکریلیک پلیټونو څنډې د لږ مقدار اګروز جیل سره مهر کړئ، کنگھه اضافه کړئ، او د کانګو غاښونه د پلیټ څخه شاوخوا 0.5-1.0 ملي متره پورته کړئ.

(d) د اګاروز جیل محلول په دوامداره توګه په شیشې یا اکریلیک پلیټ مولډ کې واچوئ (د ضخامت د DNA نمونې حجم پورې اړه لري) ، د هوا د بلبلونو د معرفي کیدو مخه نیسي. اجازه راکړئ چې په طبیعي توګه د خونې په حرارت کې ټینګ شي.

(e) د بشپړ ټینګیدو وروسته کنگھ په احتیاط سره لرې کړئ. د جیل ټانک ته د الیکٹروفورسس بفر مناسب مقدار اضافه کړئ، دا ډاډ ترلاسه کړئ چې د جیل پلیټ د الیکٹروفورسس بفر د سطحې څخه شاوخوا 1 ملي متره لاندې ډوب شوی.

(2) د عمودی Agarose جیل چمتو کول

(a) د ایتانول په مینځلو سره د شیشې پلیټونو څخه غوړ یا پاتې شنه لرې کړئ.

(b) د مخکینۍ او شاته بندونو تر مینځ د سپیسر پلیټونه ځای په ځای کړئ، د سپیسر پلیټونو څنډې د مخکینۍ او شاته بندونو سره سیده کړئ او د کلیمپونو سره یې خوندي کړئ.

(c) د سپیسر پلیټونو د څنډو تر منځ په 1x بفر کې 2% agarose اضافه کړئ ترڅو د جیل کاسټینګ چیمبر په ښکته کې د 1 سانتي مترو لوړ اګروز پلګ جوړ کړي.

(d) د اګاروز جیل په مطلوب غلظت کې، په 1x بفر کې چمتو شوی، د جیل چیمبر ته تر 1 سانتي مترو پورې پورته کړئ.

(e) کنگھه دننه کړئ، د کنگھي غاښونو لاندې د هوا بلبلونو د ځړولو څخه مخنیوی وکړئ. ځینې ​​​​وختونه، د اګاروز جیل د یخولو په وخت کې د غاښونو په غاښونو کې شکونه ښکاره کیدی شي؛ په داسې حاالتو کې، په پورتنۍ برخه کې یو څه خټکي اګرز اضافه کړئ ترڅو دا قوي شي.

(f) کنگھه لرې کړئ. د بار کولو په سلاټ کې د بفر لیکیدو مخنیوي لپاره ، د اګروز جیل پلیټ او الیکٹروفورسیس چیمبر ترمینځ اړیکه د 2٪ اګروز سره مهر کړئ او د بفر مطلوب مقدار اضافه کړئ.

(g) د جیل چیمبر ته 1x الیکٹروفورسیس بفر اضافه کړئ.

(h) د DNA نمونې په احتیاط سره د بفر لاندې د اګرز جیل باندې بار کړئ.

3

د agarose gel electrophoresis په اړه د اساسي پوهې په اړه نور معلومات، موږ به راتلونکې اونۍ شریک کړو. کاش چې دا معلومات ستاسو د تجربې لپاره ګټور وي.

د بیجینګ لیویی بایو ټیکنالوژۍ شرکت لمیټډ (Liuyi بایو ټیکنالوژي) زموږ د مسلکي تخنیکي ټیم او د R&D مرکز سره د 50 کلونو څخه ډیر وخت لپاره د الیکٹروفورسیس وسیلو په جوړولو کې تخصص لري. موږ د ډیزاین څخه تر تفتیش پورې د باور وړ او بشپړ تولید لاین لرو ، او ګودام ، او همدارنګه د بازارموندنې ملاتړ. زموږ اصلي محصولات د الیکټروفوریسس سیل (ټانک / چیمبر) ، د بریښنایی بریښنا رسولو ، نیلي LED ټرانسیلومینټر ، UV ټرانسیلومینټر ، جیل عکس او تحلیل سیسټم وغيره دي.

موږ اوس د شریکانو په لټه کې یو، د OEM الکتروفوریسس ټانک او توزیع کونکي هرکلۍ کیږي.

که تاسو زموږ د محصولاتو لپاره کوم پیرود پلان لرئ، مهرباني وکړئ له موږ سره اړیکه ونیسئ. تاسو کولی شئ موږ ته په بریښنالیک پیغام واستوئ[د بریښنالیک خوندي]یا[د بریښنالیک خوندي]، یا مهرباني وکړئ موږ ته په +86 15810650221 کې زنګ ووهئ یا واټس اپ + 86 15810650221 اضافه کړئ ، یا Wechat: 15810650221.

مهرباني وکړئ په Whatsapp یا WeChat کې اضافه کولو لپاره د QR کوډ سکین کړئ.

2


د پوسټ وخت: دسمبر-07-2023