د Cellulose Acetate Membrane Electrophoresis په واسطه د سیرم پروټین جلا کولو لپاره تجربه

اصول

د سیلولوز اسټیټ فلم الیکٹروفورسیس یو الیکٹروفورسس میتود دی چې د ملاتړ په توګه د سیلولوز اسټیټ فلم کاروي. هغه پدیده چې چارج شوي ذرات د برقی ساحې د عمل لاندې د مخالف الکترود په لور حرکت کوي د الکتروفورسیس په نوم یادیږي. څرنګه چې هر پروټین یو ځانګړی isoelectric point لري، که چیرې یو پروتین په محلول کې د pH څخه د هغې د isoelectric point څخه ټیټ وي، پروټین به په مثبت ډول چارج شي او د منفي الکترود په لور حرکت وکړي. برعکس، دا مثبت قطب ته حرکت کوي. ځکه چې د پروټین مالیکولونو سرعت په بریښنایی ساحه کې حرکت کوي د دوی چارج ، د مالیکولونو شکل او اندازې پورې اړه لري ، مختلف پروټینونه د الیکٹروفورسیس لخوا جلا کیدی شي. سیرم یو ډول پروټینونه لري، چې ټول یې په pH7.5 یا لږ کې isoelectric points لري. کله چې سیرم په pH 8.6 بفر کې د الیکٹروفورسس چلولو لپاره کیښودل شي، د سیرم ټول پروټینونه په منفي ډول چارج کیږي او په بریښنایی ساحه کې مثبت لوري ته حرکت کوي. څرنګه چې د سیروم مختلف پروټینونه په ورته pH کې مختلف چارجونه لري، د مالیکول ذرات په اندازې کې توپیر لري، او په دې توګه د مهاجرت سرعت توپیر لري، او دوی د الکتروفورسیس لخوا جلا شوي. د سیروم پروټینونو isoelectric points او مالیکولر وزنونه په لاندې جدول کې ښودل شوي:

پروټین

Isoelectric points (PI)

مالیکولر وزن

البومین

4.88

69 000

α1-ګلولین

۵.۰۰

200 000

α2-ګلولین

۵.۰۶

300 000

β-ګلولین

۵.۱۲

9 000 ~ 150 000

γ-gloulin

6.85~7.50

156 000 ~ 300 000

1

تجربه دا ده چې د وینې سیرم کې مختلف پروټینونه د سیلولوز اسټیټ جھلی (abbr. CAM) سره د ملاتړ میډیا په توګه جلا کړي. CAM یو ډول فوم شوی لوز دیeد ښه یونیفورم سره فلم، او ضخامت یې 0.1mm-1.5mm دی، کوم چې د اوبو یو مشخص جذب لري.

د CAM الیکټروفوریسس لپاره مواد، وسایل او ریجنټونه

نمونې:د صحي انسان وینې سیرم

وسیله:د بریښنا رسولو DYY-6C، د الیکٹروفورسیس ټانک DYCP-38C، غوره نمونه بارول WD-9404

1-4

reagents

1) د سیلولوز اسټیټ جھلی 7X9cm

2) د PH 8.6 barbitol buffer محلول (ionic power 0.05-0.09, it is 0.06tid time.): 1,84g Diethyl barbituric acid واخلئ، او بیا 1.03g Diethyl sodium pentobarbital واخلئ، د منحل کولو لپاره تودوخه شوي اوبه اضافه کړئ او جوړ کړئ. تر 1000ml پورې؛

3) داغ: Ponceau S 0.2g، Trichloroacetic 3g، 100 ملی لیتر اوبه اضافه کړئ؛

4) TBS/T یا PBS/T: 45 ملی لیتر 95٪ ایتانول، 5 ملی لیتر ګلیشیل اسیتیک اسید، 50 ملی لیتر اوبه اضافه کړئ؛

5) د پاکولو حل: 70ml anhydrous ethanol، 30ml glacial acetic acid.

د میتود تجربهd

1) جھلی چمتو کړئ: جھلی د باربیټل بفر محلول 30min-8h کې ډوب کړئ، او بهر یې واخلئ، اضافي محلول د جاذب کاغذ په واسطه لرې کړئ.

2) د نمونو بارول: د غشا ناڅاپه اړخ او نرم اړخ توپیر کړئ، او د 1.5 سانتي مترو په فاصله کې یو کرښه په ناڅاپه اړخ کې پورتنۍ پای ته نښه کړئ. نمونې د غوره نمونې بارولو وسیلې لخوا په ناڅاپه اړخ کې بار کړئ. یادونه: نمونې باید د جھلی په ناڅاپه اړخ کې بار شي. وروسته له دې چې د سیروم نمونې په بشپړ ډول جھلی ته ننوځي، جھلی وګرځوئ، ناڅاپه اړخ (د نمونو سره) ټانک ته مخامخ کړئ، او د نمونو سره پای په منفي الکترود کې کیښودل کیږي.

3) الیکټروفوریسس: د بریښنا رسولو فعال کړئ، 0.40.6m A/cm جھلی، د چلولو وخت 30-45 دقیقې دی. د الکتروفوریسس چلولو وروسته، بریښنا بنده کړئ.

4) داغ او پاکول: د ټانک څخه غشا وباسئ او ډوب کړئit د 5 دقیقو لپاره د رنګ محلول کې واچوئ ، او بیا یې د پاکولو محلول کې د 3-4 ځله لپاره پاک کړئ تر هغه چې د شالید رنګ روښانه نه وي. د سیروم پروټینونه باید په بندونو کې وښودل شي، او په نورمال ډول پنځه زونونه شتون لري، د نښه شوي کرښې پورتنۍ پای، البومین، α1-gloulin، α2-gloulin، β-gloulin، γ-gloulin.

5) ساتنه: وچه الکتروفوریسس واچوئبانډد 10-15 دقیقو لپاره د پاکولو محلول کې واچوئ او بیا یې وباسئ او په پاک شیشې یې وخورئ، وروسته له دې چې وچ شي، دا به یو شفاف فلم شيبانډ.

تجربهپایله

1-3

د سیروم نمونو جلا کولو اغیزه ښه ده، او د بینډ ټیلینګ پدیده شتون نلري. د پایلو تکرار وړتیا د ازموینې پروسیجرونو او د تجربه کونکي میتودونو له امله توپیر لري ، او د تکرار وړتیا لوړه ده.

پایله

د ګړندي کلینیکي الیکٹروفورسیس کشف سیسټم (د الکتروفورسیس ټانکDYCP-38Cد بریښنا رسولDYY-6C او غوره نمونه بار کول WD-9404) زموږ لخوا تولید شويشرکت بیجینګ لیویی بایو ټیکنالوژي Co., Ltdد تجربې اړتیاوې پوره کوي،اوپایلې د بیا تولید وړ، ساده او چټکې دي، د دې لپاره مناسب ديښوونهڅیړنه.

بيجينګ ليو ييد بایو ټیکنالوژۍ شرکت، لمیټډ د ژوند ساینس صنعت لپاره د الکتروفوریسس محصولاتو تولید کې تخصص لري، کوم چېپه چین کې د 50 کلونو څخه ډیر تاریخ لري او شرکت کولی شي په ټوله نړۍ کې باثباته او لوړ کیفیت لرونکي محصولات چمتو کړي. د کلونو پراختیا له لارې، دا ستاسو د انتخاب وړ دی!

موږ اوس د شریکانو په لټه کې یو، د OEM الکتروفوریسس ټانک او توزیع کونکي هرکلۍ کیږي.

زموږ په اړه د نورو معلوماتو لپاره، مهرباني وکړئ موږ سره د بریښنالیک له لارې اړیکه ونیسئ[د بریښنالیک خوندي]یا[د بریښنالیک خوندي].


د پوسټ وخت: نومبر-14-2022