Polyacrylamide Gel Electrophoresis
جیل الیکٹروفورسیس د بیولوژیکي څانګو په اوږدو کې په لابراتوارونو کې یو بنسټیز تخنیک دی چې د مایکرو مالیکولونو لکه DNA، RNA او پروټینونو جلا کولو ته اجازه ورکوي. د جلا کولو مختلف میډیا او میکانیزمونه د دې مالیکولونو فرعي سیټونو ته اجازه ورکوي چې د دوی فزیکي ځانګړتیاو په کارولو سره په مؤثره توګه جلا شي. په ځانګړي توګه د پروټینونو لپاره ، پولیکریلامایډ جیل الیکٹروفورسیس (PAGE) اکثرا د انتخاب تخنیک دی.
PAGE یو تخنیک دی چې میکرو مالیکولونه لکه پروټینونه د دوی د الکتروفوریتیک خوځښت پراساس جلا کوي ، دا د تحلیل کونکو وړتیا ده چې د مخالف چارج الیکٹروډ په لور حرکت وکړي. په PAGE کې، دا د چارج، اندازې (مالکولر وزن) او د مالیکول شکل لخوا ټاکل کیږي. تحلیلونه د پولی کریلامایډ جیل کې رامینځته شوي سورونو له لارې حرکت کوي. د DNA او RNA برعکس، پروټینونه د شامل شوي امینو اسیدونو سره سم په چارج کې توپیر لري، کوم چې کولی شي د دوی چلولو څرنګوالي اغیزه وکړي. د امینو اسید تارونه ممکن ثانوي جوړښتونه هم رامینځته کړي چې د دوی ظاهري اندازې اغیزه کوي او په پایله کې دوی څنګه کولی شي د سوري له لارې حرکت وکړي. له همدې امله کله ناکله دا مطلوب وي چې د الیکٹروفورسیس څخه دمخه پروټینونه رد کړئ ترڅو د اندازې ډیر دقیق اټکل ته اړتیا وي.
SDS پاڼه
سوډیم-ډوډیسیل سلفیټ پولیکریلامایډ جیل الیکٹروفورسیس یو تخنیک دی چې د 5 څخه تر 250 kDa د پروټین مالیکولونو جلا کولو لپاره کارول کیږي. پروټینونه یوازې د دوی د مالیکولر وزن پر بنسټ جلا شوي. سوډیم ډوډیسیل سلفیټ، یو اینونیک سرفیکټینټ، د جیلونو په چمتو کولو کې اضافه کیږي چې د پروټین نمونو داخلي چارجونه ماسکوي او د ډله ایز تناسب سره ورته چارج ورکوي. په ساده کلمو کې، دا پروټینونه ردوي او دوی ته منفي چارج ورکوي.
اصلي پاڼه
اصلي پاڼه یو تخنیک دی چې د پروټینونو جلا کولو لپاره غیر منحل شوي جیلونه کاروي. د SDS پاڼې په څیر، د جیلونو په چمتو کولو کې هیڅ ډول تخریب کونکي اجنټ نه اضافه کیږي. د پایلې په توګه، د پروټینونو جلا کول د پروټینونو د چارج او اندازې پر بنسټ ترسره کیږي. په دې تخنیک کې، د پروټینونو جوړښت، فولډ کول او امینو اسید زنځیرونه هغه عوامل دي چې جلا کول یې پورې اړه لري. په دې پروسه کې پروټینونه زیانمن شوي ندي، او د جلا کولو بشپړیدو وروسته بیرته ترلاسه کیدی شي.
polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) څنګه کار کوي؟
د PAGE اساسی اصول د بریښنایی جریان په کارولو سره د پولی کریلامایډ جیل د سوری له لارې د تحلیلونو جلا کول دي. د دې د لاسته راوړلو لپاره، د اکریلامایډ – بیساکریلامایډ مخلوط د امونیم پرسلفیټ (APS) په اضافه کولو سره پولیمیریز (پولیکریلامایډ) کیږي. عکس العمل، چې د tetramethylethylenediamine (TEMED) په واسطه کتل کیږي، د سوراخونو سره د جال په څیر جوړښت جوړوي چې د هغې له لارې تحلیل کونکي حرکت کولی شي (شکل 2). څومره چې په جیل کې د ټول اکریلامایډ فیصدي لوړه وي ، د سوري اندازه کوچنۍ وي ، له همدې امله کوچني پروټینونه چې د تیریدو وړ وي. د اکریلامایډ او بایسکریلامایډ تناسب به د سوري اندازه هم اغیزه وکړي مګر دا ډیری وختونه ثابت ساتل کیږي. د پورونو کوچنۍ اندازې هغه سرعت هم کموي چې په هغه کې کوچني پروټینونه د جیل له لارې حرکت کولی شي، د دوی ریزولوشن ښه کوي او په چټکۍ سره بفر ته د تیریدو مخه نیسي کله چې کرنټ پلي کیږي.
د Polyacrylamide Gel Electrophoresis لپاره تجهیزات
جیل الیکټروفوریسس سیل (ټانک/چیمبر)
د polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) لپاره د جیل ټانک د اګرز جیل ټانک څخه توپیر لري. د اګرز جیل ټانک افقی دی، پداسې حال کې چې د PAGE ټانک عمودی دی. د عمودی الیکٹروفورسیس سیل (ټینک/چیمبر) په واسطه، یو پتلی جیل (په نورمال ډول 1.0mm یا 1.5mm) د دوه شیشې پلیټونو ترمینځ ایښودل کیږي او ایښودل کیږي ترڅو د جیل لاندې برخه په یوه چیمبر کې په بفر کې ډوب شي او پورتنۍ برخه په بفر کې ډوب شي. په بله خونه کې. کله چې کرنټ تطبیق شي، د بفر لږ مقدار د جیل له لارې له پورتنۍ خونې څخه لاندې خونې ته لیږدول کیږي. د قوي کلیمپونو سره د دې تضمین کولو لپاره چې مجلس په مستقیم موقعیت کې پاتې کیږي ، تجهیزات د ګړندي جیل چلولو اسانه کوي حتی یخ کولو سره د جلا بډونو پایله.
د بیجینګ لیویی بایو ټیکنالوژۍ شرکت لمیټډ (Liuyi بایو ټیکنالوژي) د پولی اکریلامایډ جیل الیکٹروفورسیس حجرو (ټینکونو/چیمبرونو) یو لړ اندازې تولیدوي. د DYCZ-20C او DYCZ-20G ماډلونه د DNA ترتیب کولو تحلیل لپاره عمودی الیکٹروفورسیس حجرې (ټانګونه/چیمبرونه) دي. ځینې عمودی الیکټروفوریسس حجرې (ټانګونه/چیمبرونه) د بلاټینګ سیسټم سره مطابقت لري، لکه DYCZ-24DN، DYCZ-25D او DYCZ-25E د لویدیځ بلاټینګ سیسټم ماډل DYCZ-40D، DYCZ-40G او DYCZ-40F سره مطابقت لري، کوم چې د جیل څخه جھلی ته د پروټین مالیکول لیږدولو لپاره کارول کیږي. د SDS-PAGE electrophoresis وروسته، ویسټرن بلاټینګ یو تخنیک دی چې د پروټین په مخلوط کې یو مشخص پروټین کشف کړي. تاسو کولی شئ د تجربوي اړتیاو سره سم دا بلټینګ سیسټمونه غوره کړئ.
د بریښنا رسولو الیکٹروفورسس
د جیل چلولو لپاره بریښنا چمتو کولو لپاره، تاسو به د الیکٹروفورسس بریښنا رسولو ته اړتیا ولرئ. په Liuyi بایو ټیکنالوژي کې موږ د ټولو غوښتنلیکونو لپاره د بریښنایی تجهیزاتو لړۍ چمتو کوو. ماډل DYY-12 او DYY-12C د لوړ مستحکم ولټاژ او اوسني سره کولی شي د لوړ ولتاژ اړتیا الیکٹروفورسیس پوره کړي. دا د موقف، وخت، VH او ګام په ګام غوښتنلیک فعالیت لري. دوی د IEF او DNA ترتیب کولو الیکٹروفورسس غوښتنلیک لپاره مثالی دي. د عمومي پروټین او DNA الیکٹروفورسس غوښتنلیک لپاره، موږ ماډل DYY-2C، DYY-6C، DYY-10، او داسې نور لرو، کوم چې د الیکٹروفورسس حجرو (ټینکونو/چیمبرونو) سره د ګرم پلور بریښنا تجهیزات هم دي. دا د منځني او ټیټ ولتاژ الیکٹروفورسس غوښتنلیکونو لپاره کارول کیدی شي، لکه د ښوونځي لابراتوار کارولو، د روغتون لابراتوار او داسې نور. د بریښنا رسولو لپاره نور ماډلونه، مهرباني وکړئ زموږ ویب پاڼه وګورئ.
د Liuyi برانډ په چین کې د 50 کلونو څخه ډیر تاریخ لري او شرکت کولی شي په ټوله نړۍ کې باثباته او لوړ کیفیت لرونکي محصولات چمتو کړي. د کلونو د پرمختګ له لارې، دا ستاسو د انتخاب وړ دی!
زموږ په اړه د نورو معلوماتو لپاره، مهرباني وکړئ موږ سره د بریښنالیک له لارې اړیکه ونیسئ[د بریښنالیک خوندي] or [د بریښنالیک خوندي].
د پولی اکریلامایډ جیل الیکٹروفورسیس څه شی دی؟
1. Karen Steward PhD Polyacrylamide gel electrophoresis، دا څنګه کار کوي، د تخنیک ډولونه، او د هغې غوښتنلیکونه
د پوسټ وخت: می-23-2022